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BD細(xì)胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI

  • 更新時間:  2023-07-25
  • 產(chǎn)品型號:  556547
  • 簡單描述
  • BD細(xì)胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI
    規(guī)格:100T
    英文名:
    AnnexinV-FITC/PI
    *
詳細(xì)介紹

BD細(xì)胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI
簡單介紹:

 在正常細(xì)胞中,***脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細(xì)胞發(fā)生凋亡zui早期,膜***脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè),這一變化早于細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DN**斷化和細(xì)胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象。AnnexinV是一種***脂結(jié)合蛋白,與***脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的***脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此AnnexinV被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。***化丙***(Propidium Iodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,但凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性的增加,PI能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用,就可以將處于不同凋亡時期的細(xì)胞區(qū)分開來。

BD細(xì)胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI

組成成分:

Product code Description
556547         Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I
Components:
556547a      Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E
556547b      Annexin V-FITC (51-65874X)
556547c      Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E)

操作步驟:

貼壁細(xì)胞需用0.25%的胰酶消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的胰酶消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上***脂酰絲氨酸與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。

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